| 培养基名称 | 改良卵黄琼脂 |
|---|---|
| 英文名称: |
Egg Yolk Agar, Modified |
| 培养基类型: | 鉴别培养基 |
| 产品目录号: | M759 |
| 产品规格: |
250g，500g 50%卵黄乳液 另售 |
| 保存条件: | 密封，避光，2-30度，干燥处保存。 |
| 产品性状: |
乳白色至黄色粉末。 黄色不透明凝胶。 |
| 注意事项: | 避免摄入、呼入、皮肤接触。配制时在通风橱中进行，戴口罩、手套、护目镜。 |
| 相关产品: | 厌氧菌卵黄琼脂 卵黄琼脂 50%卵黄乳液 |
产品描述：
改良卵黄琼脂（Egg Yolk Agar, Modified）被推荐作为非选择性、加富和鉴别培养基，用于培养 、分离和鉴别梭状芽孢杆菌和其它厌氧芽孢杆菌。
改良卵黄琼脂工作原理
改良卵黄琼脂培养基是由卵黄琼脂培养基衍生而来的，基于卵磷脂酶、脂肪酶和蛋白酶活性对芽胞梭菌进行鉴别和分离。改良卵黄琼脂培养基中含有卵黄乳液，可以检测卵磷脂酶和脂肪酶活性。卵黄中的卵磷脂的降解导致菌落周围产生乳白色沉降带。脂肪酶水解卵黄中的脂肪，导致菌落表面产生彩虹色光泽。卵黄也能减弱有机过氧化物的毒性，避免后者的积累。脂肪酶活性可能会延迟，因此延长培养时间至1周再判断脂肪酶活性。蛋白酶活性表现为菌落周围产生透明带。酪蛋白胨和大豆蛋白胨提供氨基酸和其它复杂的含氮化合物。酵母提取物提供B族维生素。维生素K和氯血红素促进厌氧菌生长。半胱氨酸是还原剂，也是必需氨基酸。
改良卵黄琼脂的用途：
改良卵黄琼脂用于分离和鉴别梭菌和其它厌氧菌。
改良卵黄琼脂配方与配制方法
| 培养基成分： | 含量/L |
|---|---|
| 胰蛋白胨 | 15.0 g |
| 氯化钠 | 5.0 g |
| 大豆蛋白胨 | 5.0 g |
| 酵母提取物 | 5.0 g |
| L-半胱氨酸 | 0.4 g |
| 氯高铁血红素 | 0.005 g |
| 琼脂 | 20.0 g |
| 最终pH | 7.0 ± 0.2 |
配制方法：
1. 称取50.4g本产品，加900ml去离子水，加热使其溶解。
2. 分装成90ml到合适容器中。
3. 121度高温蒸汽灭菌15分钟。
4. 冷却至45-50°C时加入10ml预热的 50%卵黄乳液 和1ml 维生素K1。混匀后倒平板。
实验方法
1. 在接种前，从冰箱中取出培养基，使其恢复到室温。
2. 培养基必需放在厌氧容器中还原18-24h。
3. 接种培养24-72h后的纯培养物。划线分离。
4. 接种后立即将平板倒置，放在厌氧容器中。35-37ºC，培养48-72h。
5. 培养48h后观察平板上的卵磷脂酶、脂肪酶和蛋白酶活性。不要过早定论阴性结果，必需在培养7天后再做结论。
如果临床样本中疑似有梭菌，经过革兰氏染色，观察到厢型细胞，可以直接做Nagler 试验。
结果与分析
卵磷脂酶：
卵磷脂酶阳性结果表现为菌落周围有白色，不透明区域，向培养基中扩散。
卵磷脂酶阴性结果表现为菌落周围无白色不透明带。在读取卵磷脂酶阴性结果时要与空白平板对照，因为卵磷脂酶可能会分散到整个培养基中，使得读取十分困难。
脂肪酶：
脂肪酶阳性结果表现为：当光线以不同角度照射到平板上时，菌落表面有彩虹色的光泽。
脂肪酶阳性结果表现为：菌落表面无以上彩色油膜。
蛋白酶活性：
蛋白酶阳性结果表现为菌落周围有透明区。
蛋白酶阴性结果表现为缺少以上现象。
标准菌株 生长情况 lecithinase lipase 产气荚膜梭菌 ATCC13124 生长 + - 产芽胞梭状芽胞杆菌 ATCC11437 生长 - + 脆弱拟杆菌 ATCC25285 生长 - -
